培养基的选择及更换
- 发布时间：2020/6/12 9:15:41
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此外，任何培养条件的改变都有可能造成细胞系特性的改变。因此，为保证整个实验过程中细胞系的稳定，建议从一开始就选用*使用的培养基、培养基添加物等培养体系进行培养。
在某些特殊情况下，如确实需要更换培养基，可按照以下步骤进行操作，逐步使细胞适应新的培养基：
1. 以1:2的传代比例将细胞一分为二到两个新的培养皿内继续培养，其中一个培养皿作为对照，继续使用原来的培养基培养。另一个培养皿作为实验组，使用新旧培养基按照1:1配比混合后的培养基培养。
注意：采用相对较低的传代比例1:2进行传代，目的是缓解传代过程及新培养基给细胞生长带来的双重压力。
2. 分别监测两个培养皿内细胞形态、生长速率等方面的变化。如果两个培养皿内的细胞没有明显差异，则接下来仍然按照1:2的传代比例分别进行第二次传代。对照组仍然使用旧的培养基培养，而实验组则采用新旧培养基按照3:1配比混合（25% original, 75% new）后的培养基培养。
3. 继续监测两个培养皿内细胞形态、生长速率等方面的变化。如若两者之间无明显差异，则分别继续进行第三次传代。在第三次传代时仍然按照1:2的传代比例进行，实验组使用新旧培养基按照7:1（12.5% original, 87.5% new）配比混合的培养液培养。对照组仍使用旧的培养基培养。
4. 继续监测实验组和对照组细胞形态、生长速率等方面的变化。如若两者之间仍然无明显差异，则分别按照1:2的传代比例继续进行第四次传代。此时，对照组仍使用旧的培养基培养，而实验组则*更换成新的培养基培养。此时，细胞应该已经*适应新的培养基了。
注：为确认细胞是否已经*适应新的培养基，可以分别对两组细胞进行功能性测试。如果在功能性测试过程中任何一个时候，实验组表现与对照组不同，重复步骤2、3多传几代，直至与对照组细胞*一致。