1、色谱条件与系统适用性试验

 

弹性石英毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）SE-54（或DB-1701）；63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度：230℃；检测器温度：300℃；不分流进样。程序升温：初始100℃，每分钟10℃升至220℃，每分钟8℃升至250℃，保持10分钟。理论板数按α-BHC峰计算应不低于106，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

 

2、对照品储备液的制备

 

精密称取六六六（BHC）〔α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC〕、滴滴涕（DDT）〔PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT〕及五氯硝基苯（PCNB）农药对照品适量，用石油醚（60～90℃）分别制成每1ml约含4～5μg的溶液，即得。

 

混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品储备液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀释至刻度，摇匀，即得。

 

3、混合对照品溶液的制备

 

精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（60～90℃）制成每1L含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。

 

4、供试品溶液的制备药材

 

取供试品于60℃干燥4小时，粉碎成细粉，取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加水20ml浸泡过夜，加丙酮40ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6g及二氯甲烷30ml，称定重量，超声处理15分钟，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置（使分层），将有机相迅速移入装有适量*的100ml具塞锥形瓶中，放置4小时，精密量取35ml，于40℃水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚（60～90℃）如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚（60～90℃）溶解并转移至10ml具塞刻度离心管中，加石油醚（60～90℃）至5ml，小心加入硫酸1ml，振摇1分钟，离心（3000转/分）10分钟，精密量取上清液2ml，置具刻度的浓缩瓶（见图）中，连接旋转蒸发器，40℃下（或用氮气）将溶液浓缩至适量，精密稀释至1ml，即得。

 

5、制剂取供试品，研成细粉（蜜丸切碎，液体直接量取），精密称取适量（相当于药材2g），以下按上述供试品溶液制备法制备，即得供试品溶液。

 

6、测定法分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中9种有机氯农药残留量。

 

二、有机磷农药残留量测定

 

1、色谱条件与系统适用性试验

 

弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）DB-17MS（或HP-5）；氮磷检测器（NPD）；进样口温度：220℃；检测器温度：300℃；不分流进样；程序升温：初始120℃，每分钟10℃升至200℃，每分钟5℃升至240℃，保持2分钟，每分钟20℃升至270℃，保持0.5分钟。理论板数按敌敌畏峰计算应不低于6000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

 

2、对照品储备液的制备

 

精密称取对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量，用醋酸乙酯分别制成每1ml约含100μg的溶液，即得。

 

混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品储备液1ml，置20ml棕色量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。

 

混合对照品溶液的制备精密量取上述混合对照品储备液，用醋酸乙酯制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的浓度系列，即得。

 

3、供试品溶液的制备药材

 

取供试品粉末（过二号筛）5.0g，加*5g，加入醋酸乙酯50～100ml，冰浴超声处理3分钟，放置，取上层液滤过，药渣加醋酸乙酯30～50ml，冰浴超声处理2分钟，放置，滤过，合并两次滤液，用少量醋酸乙酯洗涤滤纸及残渣，与上述滤液合并。取滤液40℃下减压浓缩至近干，用醋酸乙酯转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱〔120～400目，0.25g，内径0.9cm（如Supelclean

 

ENVI-CarbSPETubes，3ml活性炭小柱），用醋酸乙酯5ml预洗〕上，置多功能真空样品处理器上，用正己烷﹣醋酸乙酯（1:1）的混合液5ml洗脱,收集洗脱液,置氮吹仪上浓缩至近干，精密加入醋酸乙酯1ml使溶解，即得。

 

4、测定法分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，分别注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中12种有机磷农药残留量。