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显微分光光度计在显微镜上附加光度测量系统

时间:2020-07-17      阅读:39

显微分光光度计在显微镜上附加光度测量系统

显微分光光度计则采用了双波长细胞光度测量法,可在显微镜
下对单个细胞微细结构中的核酸、蛋白质、酶、糖原等化学物质进
行形态学定性定位观察,又可进行定量测定。该仪器具有作透射光
照明的吸收光测量、落射光照明的荧光和反射光测量及荧光光谱分
析等多种定性定量测定功能。一般采用二波长一测量场法,也可采
用一波长二测量场法或单束光扫描测量法测定细胞化学反应后被测
物质的相对含量,由计算机程控,对各测量点的透光强度值进行处
理,并进行消光值计算和分析,打印出细胞化学反应产物的光密度
值(O.D)、光密度分布直方图、样品的数字图形及各种信息的分析
结果。但显微分光光度计价格昂贵,功能较少,目前应用不多。

用于吸收细胞光度测量的商品仪器,用于扫描和集成显微密度
测量。有的通常在显微镜上附加一个光度测量系统作为测量仪器。
有一种显微测密度计(microdensitometer)也可测量细胞化学反应(
如DNA的Feulgen反应)的密度,以确定DNA等物质的含量。
又如扫描显微镜光度计系统是由一架标准显微镜和两台光度计
组成。这些仪器由于价格及用于细胞化学反应的定量测定有一定的
局限性,尚未得到广泛的推广应用。

微荧光测量(microfluorimetry)
荧光测量法,只能用于细胞化学中的荧光反应终产物。该法
灵敏度较高,特异性可通过选择适当的激发波长和发射测定波长而
获得。
显微镜不可分辨的小颗粒,用荧光可以测定,且无分布性误差
,因此可以用单个测量点代替大面积测量,从而节省许多时间。用
落射光可测量不透明的或厚的标本。但荧光测量的实际应用还是有
限,能进行荧光反应的物质及建立恰当的标准物尚

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