IEC系列的分离条件
时间：2023-09-26 阅读：147
常用流动相可以使用下述缓冲溶液或者氯化钠、硫酸钠、硫酸钾等盐溶液。而且也可以在缓冲溶液中添加盐。总盐浓度一般为20 mM ~ 1 M。
乙二醇和2-丙醇等极性有机溶剂，可以上限为20 % (v/v)。
梯度洗脱时请按下述顺序进行色谱柱的平衡。
缓冲液A(低离子强度)通夜10 mL。
缓冲液B(高离子强度)通夜40 mL置换成正确的反离子。
缓冲液A通夜15 mL平衡。
IEC QA-825、DEAE-825作为流动相使用的缓冲溶液，必须和缓冲离子具有相同的正电荷，且在使用的pH条件下有足够的缓冲能力。
| pH range | Buffer |
|---|---|
| 4.8 - 5.0 | N-Methylpiperazin·HCl |
| 5.0 - 6.0 | Piperazine·HCl |
| 5.5 - 7.3 | Bis-Tris*1·HCl |
| 6.4 - 7.3 | Bis-Tris Propane*2·HCl |
| 7.3 - 7.7 | Triethanolamine·HCl |
| 7.5 - 8.0 | Tris·HCl |
| 8.0 - 8.5 | N-Methyldiethanolamine·HCl |
| 8.4 - 8.8 | Diethanolamine·HCl |
| 8.5 - 9.0 | 1,3-Diaminopropane·HCl |
| 9.0 - 9.5 | Ethanolamine·HCl |
- *1 2-bis(2-hydroxyethyl amino-2-(hyroxymethyl)-13-propanediol)
*2 1,3-bis(tris(hydroxymethyl)methylamino)propane
IEC SP-825、CM-825作为缓冲液使用的流动相，必须和缓冲离子拥有相同的正电荷，且在使用时的pH条件下有足够的缓冲能力。
| pH range | Buffer |
|---|---|
| 3.8 - 4.3 | Sodium Formate |
| 4.3 - 4.8 | Sodium Succinate |
| 4.8 - 5.2 | Sodium Acetate |
| 5.0 - 6.0 | Sodium Malonate |
| 5.5 - 7.0 | 2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid (MES) |
| 6.7 - 7.6 | Sodium Phosphate |
| 6.8 - 8.2 | 2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl]-ethanesulfonic acid (HEPES) |
| 7.7 - 9.1 | N,N-Bis(2-hydroxyethyl) glycine (BICINE) |
| 8.6 - 10.0 | 2-(cyclohexylamino)ethanesulfonic acid (CHES) |