研究的物种蛋白质结构、功能生物电子显微镜
时间:2020-07-17 阅读:35
研究的物种蛋白质结构、功能生物电子显微镜
蛋白质定性可能会包括结构、功能和遗传学的信息,要进行这样的
研究很可能会需要至少克级量的纯蛋白质。理想的纯化应当步骤少
、每步的回收率高,然而,如果每步的回收率差(<50%),应当有
一些指标来表明是什么原因导致了活性损失,是因为追求纯度而丢
弃在其他组分中了,还是活性真的损失了。如果是后一种情况,终
产物的活性会低于总活性,尽管用标准分析会显示很好的同质性(h
omogeneity)。在每一步的回收率和纯化效果之间的选择会是一个
问题,取层析峰的一个窄截取(cut)峰会得到很纯的组分,但是在
另一方面也损失了大量的较低纯度的活性成分,在做这样的抉择时
,必须要遵循这样的准则:如果产量不重要,那么为了纯度而选择
低产量就合乎逻辑。
蛋白质纯化的原料
对于从事蛋白质纯化项目的许多人来说,原料是无法选择的,
他们正在研究某一特定的生物组织或器官,目的是从这种原料中纯
化某种蛋白质,但是仍然可以找到一些稍简单的方法。例如,如果
很难得到大量的原料,先用易得原料的物种进行试验,典型的
例子是:当所研究的物种是人时,由于实际情况和(或)道德的原因
而不容易得到组织样品。在这种情况下,通常到容易得到哺乳动物
组织的地方(如屠宰场),使用牛、绵羊或猪的替代原料进行试验,
一旦设计出一种从替代原料中纯化蛋白质的方案,那么要研制一种
从人原料中纯化蛋白质的方案就会容易得多——使用*相同的方
法就会取得满意的效果。在大约1亿年(这是将大多数高等哺乳动物
分类在一起的一个时间范围)间分化的物种之间,蛋白质含量的差
异十分微小,这样,来源于不同动物的蛋白质用各种分级分离的方
法分离时,其分离行为很可能相似。如用猪的组织设计出的一种方
案很可能只需要进行很小的修改就可以用在人的组织上。
另外主要关注蛋白质(特别是酶)的功能。在整个进化过程中,
通常情况下,哪些功能和作用是十分保守的?在这种情况下,对可
能的原料来源进行初步的筛选,也对文献进行初步的筛选,然
后再确定适合于研究目的的原料。
(本文由上海光学仪器厂编辑整理提供, 未经允许禁止复制http://www.sgaaa.com)